中华预防医学杂志    2018年12期 2016年云南省德宏傣族景颇族自治州新报告HIV感染者原发性耐药研究    PDF     文章点击量:129    
中华预防医学杂志2018年12期
中华医学会主办。
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文章信息

杨锦 陈晓晨 段星 王继宝 王译葵 杨涛 叶润华 杨跃诚 姚仕堂 段松 何纳
YangJin,ChenXiaochen,DuanXing,WangJibao,WangYikui,YangTao,YeRunhua,YangYuecheng,YaoShitang,DuanSong,HeNa
2016年云南省德宏傣族景颇族自治州新报告HIV感染者原发性耐药研究
Primary drug resistance among newly reported HIV infections in Dehong Prefecture of Yunnan province, 2016
中华预防医学杂志, 2018,52(12)
http://dx.doi.org/10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2018.12.022

文章历史

投稿日期: 2018-08-10
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2016年云南省德宏傣族景颇族自治州新报告HIV感染者原发性耐药研究
杨锦 陈晓晨 段星 王继宝 王译葵 杨涛 叶润华 杨跃诚 姚仕堂 段松 何纳     
杨锦 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
陈晓晨 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室/公共卫生安全教育部重点实验室
段星 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
王继宝 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
王译葵 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
杨涛 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
叶润华 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
杨跃诚 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
姚仕堂 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
段松 678400 芒市,云南省德宏州疾病预防控制中心性病艾滋病防治科
何纳 复旦大学公共卫生学院流行病学教研室/公共卫生安全教育部重点实验室
摘要:
关键词 :HIV;中国;缅甸;原发性耐药;基因亚型
Primary drug resistance among newly reported HIV infections in Dehong Prefecture of Yunnan province, 2016
YangJin,ChenXiaochen,DuanXing,WangJibao,WangYikui,YangTao,YeRunhua,YangYuecheng,YaoShitang,DuanSong,HeNa     
Institute of HIV/AIDS Control and Prevention, Dehong Prefecture Center for Disease Control and Prevention, Mangshi 678400, China
Corresponding authors: He Na, Email: nhe@fudan.edu.cn
Abstract:
Key words :HIV;China;Burmese;Primary drug resistance;Gene subtype
全文

高效逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral treatment, HAART)自2003年推广以来,有效降低了HIV感染相关疾病的发病率和死亡率,延长了HIV感染者寿命,同时也促进了HIV耐药突变和耐药株的发生[1,2]。国内关于新报告HIV感染者原发性耐药的研究较少,所报道的耐药率为1.6%~12.2% [3,4,5,6,7]。云南德宏傣族景颇族自治州(德宏州)地处西南边疆,与缅甸接壤,是国家HIV防治重点地区[8]。了解德宏州新报告HIV感染者原发性耐药情况,可指导抗病毒治疗,有效预防继发性耐药发生。为此,本研究对德宏州2016年新报告HIV感染者进行了原发性耐药研究。

一、对象与方法  

1.对象:  2016年,选择德宏州新报告的739例HIV感染者为研究对象,纳入标准为:(1)首次确证阳性且未经抗病毒治疗;(2)首次确诊HIV阳性时的抗凝血标本≥200 μl,且血浆HIV病毒载量Vira(Lood,VL)≥1 000拷贝/ml;(3)年龄≥18周岁。本研究通过了云南省疾病预防控制中心伦理委员会审核。研究对象均签署了知情同意书。

2.研究方法:  (1)HIV核糖核酸(RNA)提取:采集研究对象首次确诊HIV阳性时的静脉血,进行CD4+T淋巴细胞计数和血浆HIV VL检测。使用法国生物梅里埃公司生产的试剂盒(NucliSENS EasyQ)及全自动核酸提取仪(NucliSENS EasyMAG)提取HIV RNA,具体操作严格按照说明书进行。(2)pol基因区扩增:应用巢式逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增得到HIV-1 pol基因片段,扩增引物及反应条件见表1。(3)PCR扩增产物测序:使用质量分数1%琼脂糖凝胶电泳观察PCR产物条带,阳性标本送北京诺赛基因组研究中心有限公司进行基因测序。(4)HIV耐药基因亚型和耐药分析:对基因序列使用Vector NIT advance 10软件进行编辑和拼接;使用Bio-edit软件对样本序列和标准参考株序列进行比对和矫正;将最终的序列提交到美国斯坦福大学的HIV耐药数据库(http://hivdb.stanford.edu/),参照WHO耐药位点突变列表(2009年),确定耐药突变位点和耐药程度。只要对一种药物发生耐药即定义为耐药,潜在耐药归为不耐药。

表12016年云南德宏傣族景颇族自治州新报告HIV感染者pol基因区扩增引物及反应条件

3.统计学分析:  运用Excel 2010收集整理数据,采用SPSS 22.0分析数据。年龄符合正态分布,采用±s表示;不同国籍间民族、文化程度、感染途径、婚姻状态、耐药率的构成比或率差异采用χ2检验进行分析。以P<0.05为差异具有统计学意义。

二、结果  

1.基本情况:  739例研究对象年龄为(34.8±11.6)岁,不同国籍间民族、文化程度、感染途径、婚姻状态的构成比差异均有统计学意义(P值均<0.001),具体见表2

表22016年云南德宏傣族景颇族自治州新报告中国和缅甸籍HIV感染者的基本特征比较[n(%)]

2.HIV基因亚型:  739例研究对象,有584例成功扩增出pol基因,其中URFC01_AECRF61_BCCRF65_CPXCRF62_BCB亚型分别占33.4%(195例)、27.4%(160例)、17.1%(100例)、4.1%(24例)、4.1%(24例)、3.9%(23例)和3.6%(21例)。

3.HIV耐药率、耐药突变位点及药物耐药情况:  584例具有pol基因的研究对象中,67例具有耐药突变位点(11.4%);根据WHO耐药位点突变列表(2009)的判定标准,20例具有耐药性,耐药率为3.4%。中国籍感染者的耐药率[2.8%(7/247)]与缅甸籍耐药率[3.9%(13/337)]差异没有统计学意义(χ2=0.45,P=0.502);有1例对蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PIs)耐药,其耐药突变位点是M46L,为低度耐药;有3例对核苷类逆转录酶抑制剂(nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NRTIs)耐药,其耐药突变位点包括T215D、M184Ⅴ、M184I;有20例对非核苷类逆转录酶抑制剂(non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NNRTIs)耐药,14例对奈韦拉平(nevirapine, NVP)高度耐药、10例对依非韦伦(efavirenz, EFV)高度耐药。其耐药突变位主要包括K103N(5例)、Y181C(5例)、K101E(3例)、V179T(2例)等。

三、讨论  本研究发现,2016年云南省德宏州新报告HIV感染者原发性耐药率为3.4%,低于Chen等[9]报道的2009—2011年云南省德宏州未治疗HIV原发性耐药率(4.3%),说明德宏州现行抗病毒治疗方案依然具有成效,且中缅两国籍感染者之间耐药水平并无显著性差异。
        本研究发现,出现频率较高的耐药突变位点是K103N与Y181C。K103N可以把EFV、依曲韦林(Etravirine,ETR)和利匹韦林(Rilpivirine,RPV)的敏感性分别降低3~10倍、1~5倍和2倍[10,11],Y181C可以把NVP、ETR和RPV的敏感度分别降低50倍、5倍和3倍[12]
        不同于国内其他地区HIV流行株相对较为单一的流行特征,德宏州HIV基因亚型种类繁多且复杂,这与德宏州地处西南边疆,与缅甸接壤,多民族聚居,环境复杂,毒品滥用以及HIV流行史长等原因带来的流行毒株多样化有关。本研究共发现包括CURF01_AEB等在内的29种亚型[13,14],中国籍(33.2%)与缅甸籍(33.5%)均以URF型为最具优势毒株,这与本地区的先前研究结果不一致,独特型重组样本占优势,可能与本研究所选样本为抗病毒治疗失败人群有关。
        综上所述,德宏州新报告HIV感染者的原发性耐药水平处于低流行状态,表明高效抗逆转录病毒治疗方法对艾滋病疫情的控制依然有效。中缅不同国籍HIV感染者的中高频耐药突变位点不同,对不同药物敏感性也有差异,有必要继续加强原发性耐药检测工作,为制定更加科学的HIV治疗方案提供科学依据。

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